空氣消毒效果的監測方法

根據衛生部印發的《消毒技術規范》的相關規定，《循環風紫外線空氣消毒機》空氣消毒效果的檢測，只作靜態效果監測，具體消毒標準及監測方法如下：

3.17.8  空氣消毒機效果的監測

3.17.8.1采樣時間：在消毒處理后、操作前進行采樣。

3.17.8.2 采樣方法：平板暴露法

       ﹙1﹚布點方法：室內面積≤30㎡，設內、中、外對角線3點，內、外點布點部位距墻壁1M處；室內面積＞30㎡，設4角及中央5點，4角的布點部位距墻壁1m處.

﹙2﹚采樣方法：將普通營養瓊脂平板﹙直徑為9cm﹚放在室內各采樣點處，采樣高度為距地面1.5m采樣時將平板蓋打開，扣放于平板旁，暴露5min,蓋好立即送檢。

3.17.8.3 檢測方法：按照2.1.3要求進行。

平板暴露法結果計算公式：

細菌總數﹙cfu/m3﹚=50000N/﹙A×T﹚

式中A為平板面積﹙c㎡﹚；T為平板暴露時間〔min〕;N為平均菌落數﹙cfu﹚.

3.17.8.4 結果判定

I類區域：細菌總數≤10cfu/m3﹙或0.2cfu/平板﹚，未檢出金黃色葡萄球菌﹑溶血性鏈球菌為消毒合格；

II類區域：細菌總數≤200cfu/m3﹙4cfu/平板﹚,未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格；

III類區域：細菌總是≤500cfu/m3﹙或10cfu平板﹚,未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格。

3.17.8.5 注意事項

采樣前，關好門、窗，在無人走動的情況下，靜止10min進行采樣。

附件一：

空氣消毒效果鑒定試驗

2.1.3.1 目的     

檢測消毒器或消毒劑對空氣中細菌的殺滅和﹙或﹚消除作用，以驗證其對空氣的消毒效果。其他方法對空氣的消毒效果，亦可參照本試驗的有關原則進行。

2.1.3.2 試驗設備和器材

﹙1﹚試驗菌為白色葡萄球菌8032，其菌懸液的制備方法見2.1.1.2。

﹙2﹚采樣液【用于液體撞擊式采樣器采樣。非化學因子殺菌試驗時，用含抗泡沫劑﹙辛醇或橄欖油﹚的營養肉湯培養基；消毒劑殺菌試驗時，用含相應中和劑的營養肉湯培養基﹙同樣加入辛醇或橄欖油﹚】。

﹙3﹚中和劑﹙按2.1.1.5方法鑒定合格者﹚。

﹙4﹚磷酸鹽緩沖液﹙PBS，0.03mol/L，pH7.2﹚。

﹙5﹚普通營養肉湯培養基。

﹙6﹚普通營養瓊脂培養基。消毒劑殺菌試驗時，尚需在其中加入相應的中和劑。

﹙7﹚相鄰的一對氣霧柜或氣霧室，一個用于消毒試驗，一個用于試驗對照。一對氣霧柜或氣霧室所處環境﹙包括溫度、濕度、、光照、密閉性、和通風條件等﹚應一致。柜﹙或室﹚宜以鋁合金和玻璃構建。應安裝溫度和濕度調節裝置以及通風機過濾除菌或其他消毒裝置和相應管道，此外，還應開設供噴霧染菌、給消毒劑、采樣等的袖套操作和樣本傳遞等窗口。

﹙8﹚噴霧染菌裝置，包括空氣壓縮機、壓力表、氣體流量計和氣溶膠噴霧器等。噴出細菌氣溶膠微粒的直徑90%以上1um～10um之間。

﹙9﹚空氣微生物采樣裝置，包括六級篩孔空氣撞擊式采樣器、液體撞擊式采樣器、抽氣設備、氣體流量計等。

﹙10﹚環境監測器材，如溫度計、濕度計等。

2.1.3.3 試驗階段

    空氣消毒試驗分為實驗室試驗、模擬現場試驗與現場試驗。三個階段試驗的特點見表2-5。

2.1.3.4 實驗室試驗與模擬現場試驗操作程序

﹙1﹚取試驗菌菌懸液，用無菌脫脂棉過濾后，再用營養肉湯培養基稀釋成所需濃度。

﹙2﹚同時調節兩個氣霧柜﹙或室﹚的溫度、相對濕度至試驗要求的溫度和相對濕度。

﹙3﹚將使用的器材一次放入氣霧柜﹙或室﹚內，將門關閉。此后，一切操作和儀器設備的操縱均在柜﹙或室﹚外通過帶有密封袖套的窗口或遙控器進行。直至試驗結束后，始可將門打開。

﹙4﹚按設定的壓力、氣體流量及噴霧時間噴霧染菌。邊噴霧染菌，邊用風扇攪拌。噴霧染菌完畢，繼續攪拌5min,而后靜置5min。

﹙5﹚同時對對照組和試驗組氣霧柜﹙或室﹚分別進行消毒前采樣，作為對照組試驗開始前和試驗組消毒處理前的陽性對照﹙即污染菌量﹚。氣霧柜﹙或室﹚內空氣中各陽性對照菌數應達5×10⁴cfu/m3～5×10⁶cfu/m3。

               表 2-5 各階段空氣消毒試驗的特點

在模擬現場試驗時，用六級篩孔空氣撞擊式采樣器采樣，采樣時，將六級篩孔空氣撞擊式采樣器放在柜室中央1m高處﹙采樣方法按采樣器使用說明書進行﹚。在實驗室試驗時，用液體撞擊式采樣器采樣，采樣器置柜中央處。

﹙6﹚按產品說明書規定的方法，在試驗組氣霧柜﹙或室﹚內進行消毒。對照組氣霧柜室同時作相應﹙不含消毒劑﹚處理。

﹙7﹚作用至規定時間，對試驗組和對照氣霧柜﹙或室﹚按前述方法同時進行采樣。繼續作用至第二個預定消毒時間，再次按前述方法進行采樣。如此按作用時間分段采樣，直至規定的最終作用時間為止。

﹙8﹚在實驗室試驗階段，用液體撞擊式采樣器采集的樣本，2.1.1.3所示方法進行活菌培養計數，在37°C培養箱內培養48h,觀察最后結果。

﹙9﹚在模擬現場試驗階段，用六級篩孔空氣撞擊式采樣器采樣時，采樣平板直接放入37°C培養箱中培養48h，觀察最后結果，計數生長菌總數。

﹙10﹚全程試驗完畢，對氣霧柜﹙室﹚表面和空氣中殘留的細菌做最終消毒后，打開通風機，過濾除菌排風，排除柜﹙或室﹚內滯留的污染空氣，為下一次試驗作好準備。

﹙11﹚在完成試驗組與陽性對照組采樣和樣本接種后，應將未用的同批培養基、采樣液和PBS等﹙各取1份～2份﹚，與上述兩組樣本同時進行培養或接種后培養，作為陰性對照。若陰性對照組有菌生長，說明所以培養基或試劑有污染，試驗無效，更換無菌器材重新進行。

﹙12﹚同一條件試驗重復3次，每次均分別計算其殺滅率。3次結果的殺滅率均≥99.90%時，可判為消毒合格。殺滅率的計算方法如下：

  N_t=×100%                k_t=×100%

N_t：空氣中細菌的自然消亡率；

V_O與 V_t：分別為對照組試驗開始前和試驗過程中不同時間的空氣含菌量；

K_t:消毒處理對空氣中細菌的殺滅率；

V_O^′與V_t^′：分別為試驗組消毒處理前、和消毒過程中不同時間的空氣含菌量。

消毒前后空氣中含菌量按下列公式計算：

空氣含菌量﹙cfu/m3﹚=

【舉例：用某消毒劑對氣霧柜內空氣消毒10min,試驗組消毒前空氣含菌量為100 000cfu/m3，消毒后為50cfu/m3；對照組處理前空氣含菌量為90 000cfu/m3，處理后為50 000cfu/m3。該消毒劑作用1010min對空氣中微生物的殺滅率按下法計算：

eq \o\ac(○,1)1、細菌在空氣中10min的自然消亡率為：

N_t=×100%₌44.44%

  eq \o\ac(○,2)2、對空氣中微生物的殺滅菌為：

              K_t=×100%

                        ₌×100%=99.91%

 該次試驗，消毒劑作用10min,可將空氣中細菌殺滅99.9%。

2.1.3.5現場試驗

     ﹙1﹚根據使用時的實際情況，選擇有代表性的房間并在室內無人的情況下進行消毒效果觀察。觀察時，在消毒處理前用六級篩孔空氣撞擊式采樣器進行空氣中自然菌采樣，作為消毒前樣本﹙陽性對照﹚。消毒處理后，再作一次采樣，作為消毒后的試驗樣本。

     ﹙2﹚采樣時，采樣器置室內1.0m高處。房間大于10㎡者，每增加10㎡增設一個采樣點。

    ﹙3﹚因現場試驗環境條件變化較多，難以統一，無法測定準確的自然沉降率，故只按所得消亡率﹙自然衰亡和消毒處理中殺菌的綜合效果﹚做出驗證結論。消亡率的計算按下式進行：

消亡率=×100%

【舉例：一無人手術室，消毒前采樣，空氣中的平均含菌量為5000cfu/m3。用某消毒劑噴霧對室內空氣消毒30min后采樣，含菌量減至50cfu/m3。該消毒劑處理30min后，室內空氣中自然菌的消亡率可按下法計算：

消毒率= EQ ×100%=99%

該消毒劑作用30min,可使用房間內空氣中自然菌的消亡率達99.00%。

﹙4﹚試驗采樣完成后，應將未用的同批培養基，與上述試驗樣本同時進行培養或接種后培養，作為陰性對照。陰性對照組若有菌生長，說明所以培養基有污染，試驗無效，更換后重新進行。

﹙5﹚試驗重發3次或以上。計算出每次的消亡率。除有特殊要求者外，對無人室內進行的空氣消毒，每次的自然菌消亡率≥90%者為合格。

2.1.3.6 注意事項

      ﹙1﹚試驗中，因控制統一的條件較難，故每次均需同時設置試驗組與對照組。兩組條件盡量保持一致。消毒前、后及不同次數間的環境條件亦應盡量保持一致。

      ﹙2﹚注意記錄試驗過程中的溫度和相對濕度，以便分析對比。

      ﹙3﹚所采樣本應盡快進行微生物檢驗，以免影響結果的準確性。

      ﹙4﹚每次試驗完畢，氣霧柜、氣霧室應充分通風。必要時消毒沖洗，間隔4h后始可做第二次試驗。

      ﹙5﹚試驗時，氣霧柜﹙室﹚必須保持密閉，設有空氣過濾裝置，以防染菌空氣外逸，污染環境。

      ﹙6﹚試驗時，氣霧柜、氣霧室或現場房間應防止日光直射，以免照成殺菌作用不穩定。

      ﹙7﹚氣霧柜排風過濾裝置中的濾材應定期更換，換下的濾材應經滅菌后在作其他處理。

      ﹙8﹚在氣霧柜或密閉房間內進行消毒劑噴霧消毒時，用懸掛染菌樣片法觀察的消毒效果，不能代表對空氣的消毒效果。